技术文献
细胞样本在流式细胞仪分选后,保存和处理方法如下:
保存方法:
短期保存(数小时至数天):
置于4℃冰箱:在含有适当培养基和血清的条件下,可保存较短时间,但细胞活性可能会逐渐下降。
可添加细胞保护剂,如DMSO(二甲基亚砜),但需注意其浓度和对细胞的影响。
长期保存(数周、数月甚至数年):
液氮冻存:将细胞悬浮在含有冷冻保护剂(如10%DMSO和90%胎牛血清)的培养基中,逐步降温至-80℃,然后转移至液氮中保存。
处理方法:
继续培养:
如果细胞活性良好,可将分选后的细胞接种到新的培养皿或培养瓶中,在合适的培养条件下继续培养。
定期观察细胞状态,监测细胞生长和增殖情况。
实验分析:
提取DNA、RNA或蛋白质进行分子生物学分析,如PCR、测序、Western blot等。
进行细胞功能实验,如增殖实验、迁移实验、凋亡检测等。
细胞固定:
若要进行免疫荧光染色等形态学观察,可以使用多聚甲醛等固定剂对细胞进行固定。
在保存和处理分选后的细胞时,要始终注意无菌操作,避免细胞污染,同时根据具体的实验需求和细胞特性选择合适的方法。
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