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生物碱试剂沉淀蛋白质的原理:
植物体内具有显著生理作用的含氮碱性化合物成为生物碱。能沉淀生物碱或与其产生颜色反应的物质称为生物碱试剂。当溶液PH小于等电点时,蛋白质颗粒带正电荷,容易与生物碱试剂的负离子发生反应而沉淀。
生物碱试剂本质就是酸类,它们一般均导致蛋白质变性。
因为反应机理是,跟蛋白质侧链上阳性离子(如氨基等)发生酸碱成盐反应,而侧链氨基常参与蛋白质的高结构或酶的活性中心,因此变性。(蛋白质盐是很大的分子,沉淀是很自然的)。
生物碱的碱化、提取、滴定处理程序
按下列任何一种方法处理后测定
①将有机溶剂蒸干,于残渣中加定量过量的酸滴定液使溶解,再用碱滴定液回滴剩余的酸;若生物碱易挥发或分解,应在蒸至近干时,先加入酸滴定液"固定"生物碱,再继续加热除去残余的有机溶剂,放冷后完成滴定。
②将有机溶剂蒸干,于残渣中加少量中性乙醇使溶解,任何用酸滴定液直接滴定。
③不蒸去有机溶剂,而直接于其中加定量过量的酸滴定液,振摇,将生物碱转提入酸液中,分出酸液置另一锥形瓶中,有机溶剂层再用水分次振摇提取,合并水提取液和酸液,后用碱滴定液回滴定。
按照生物碱的基本结构,已可分为60类左右。主要有以下类型:
1、有机胺类,如麻黄碱、益母草碱、秋水仙碱。
2、吡咯烷类,如古豆碱、千里光碱、野百合碱。
3、吡啶类,如菸碱、槟榔碱、半边莲碱。
4、异喹啉类,如小檗碱、吗啡、粉防己碱。
5、吲哚类,如利血平、长春新碱、麦角新碱。
6、莨菪烷类,如阿托品、东莨菪碱。
7、咪唑类,如毛果芸香碱。
8、喹唑酮类,如常山碱。
9、嘌呤类,如咖啡碱、茶碱。
10、甾体类,如茄碱、浙贝母碱、澳洲茄碱。
11、二萜类,如乌头碱、飞燕草碱。
12、其他,如加兰他敏、雷公藤碱。
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